简要说明：中国科学院牌的山梨酸检测及测定-中国科学院广州化学研究所分析测试中心产品：估价：300，规格：bhy123，产品系列编号：036

山梨酸检测及测定

中国科学院广州化学研究所分析测试中心

事业部-----卿工---18933946343

简介 

山梨酸及山梨酸钾（以下简称山梨酸及钾盐）是一种良好的食品防腐剂。 

性状 

本品为白色至微黄白色结晶性粉末；有特臭。本品在乙醇中易溶，在乙醚中溶解，在水中极微溶解。 主要用途 

  广泛用于食品、化妆品、农产品等行业。霉菌和酵目菌的抑制剂、食品防霉剂、干性油类变性剂、杀菌剂等。 

山梨酸的检测方法  

1 .高效液相色谱法测定山梨酸 

[1] 采用高效液相色谱法测定咸菜中的山梨酸,方法简单,快速,分离效果好,灵敏度较高。  2.1.1 实验部分  

2.1.1.1 试剂甲醇（色谱纯）。 2.1.1.2 山梨酸标准溶液由国家标准物质中心提供,标准溶液浓度为1mg/mL。再用水稀释10倍配制成100μg/mL混合标准溶液。 2.1.1.3 仪器HP1000 高效液相色谱仪(带紫外检测器)；离心机；pH 计。 2.1.1.4 色谱仪工作条件色谱柱：HPODS Hypersil（C18）5μm ，125×4mm；流动相：甲醇-乙酸铵缓冲溶液(pH4.6)(60+40)；流速：1.0mL/ min。扫描波长：200.0~300.0；测定波长：220.0。  

2.1.1.5 样品预处理准确称取切碎样品3.000-5.000g，放入。50mL 比色管中，并加水至刻度，振荡、摇匀、静置半小时后，用定量滤纸过滤，备用。取上述过滤液用1+1 氨水调至pH7，经0.45μm 滤膜过滤后作为待测液。 

 2.1.1.6 标准曲线绘制取100μg/mL 混合标准溶液0.0, 0.5, 1.0,2.0 ,5.0 mL于10mL 容量瓶中,用水定容至刻度,配制成0, 5,10,20, 50μg/mL 混合标准系列, 取10μL注入高效液相色谱仪中,记录各色谱峰保留时间,峰面积,绘制标准曲线。 

 2.1.1.7 样品测定取10μL 样品待测液注入液相色谱仪中，比较样品与标准组分的保留时间,吸收光谱特性进行定性,用外标法定量。 

 2.1.2 结果与讨论 2.1.2.1 分离条件的选择在上述色谱条件下测定，保留时间为山梨酸1.682 min，各组份分离效果较好。标准曲线的回归系数均达到0.999。 

 2.1.2.2 样品处理咸菜中所含蛋白较少可以不需加沉淀剂,直接浸泡后测定.咸菜中的氯化钠对实验不干扰。 

 2.1.2.3合格样品通过对所采10份样品进行检测,样品中所含的山梨酸

<0.1mg/kg,全部合格。 2.1.2.4 准确度试验分别对窄菜,咸黄瓜,糖醋蒜进行加标回收测定，山梨酸平均回收率为97.6%，结果见表1。 表1 样品加标回收率测定结果 样品      项目      加标量（μg）    测量值（μg）     回收率（%） 窄菜      山梨酸         50          45.2              90.4 咸黄瓜    山梨酸         50          52.0              104 糖醋蒜    山梨酸         50          44.7              89.4       2.1.2.5 精密度试验对同一样品重复测定5 次，山梨酸含量的平均值分别为0.0969 mg/kg (范围为0.0945~0.100 mg/kg)、0.0932mg/kg(范围0.0893~0.0964mg/kg),相对标准偏差分别为2.4%、2.3%。  2. HPLC法测定山梨酸的含量  

将多维生素糖浆直接用纯水稀释后以 HPLC 法测定防腐剂山梨酸的含量。方法快速、简便、灵敏、准确, 可有效控制多维生素糖浆的质量和用药安全。  2.2.1 试剂与仪器  

2.2.1.1 试剂  山梨酸对照品( 中国药品生物制品检定所)  多维生素糖浆( 韩国永进药品有限公司); 甲醇为色谱纯, 水为超纯水, 己烷磺酸钠、三乙胺、乙酸为分析纯。 2.2.1.2 仪器  岛津 LC-2010C高效液相色谱-紫外仪和CLASSVP色谱工作站。 2.2.2 方法与结果 2.2.2.1 色谱条件  色谱柱: Allthna C18柱(4.6*250mm, 5um);流动相 A: 8mmol* L- 1己烷磺酸钠溶液(1000mL溶液加入三乙胺0.25mL和乙酸9.2mL)；流动相B:甲醇; 流

速:1.0mL*min-1，按表2进行梯度洗脱；检测波长：280nm；柱温：25℃；进样量:10uL。                         

  2.2.2.2 对照品储备溶液的制备    精密山梨酸对照品11.67mg(99.7%),分别置10mL 量瓶中, 均加水溶解并稀释至刻度,摇匀,得到山梨酸(1.1635mg* mL- 1)对照品储备溶液。 2.2.2.3 系统适用性试验  分别量取2.2项下各对照品储备液适量, 加水制成每1mL中约含。山梨酸0.15mg 的混合标准溶液, 精密量取该混合标准溶液10uL, 按上述色谱条件分析, 记录色谱图。结果该物质与相邻色谱峰分离度均大于1.5, 理论塔板数均大于2000。山梨酸的保留时分别为30.1min、17.6min、19.3min、40.3min  

2.2.2.5样品测定与结果  取多维生素糖浆(乐唯多)3批,各精密量取10mL,50mL量瓶中, 用水洗出移液管内的附着液并入量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,为供试品溶液; 另取山梨酸对照品各适量, 加水制成每1mL中约含山梨酸。0.3mg 的溶液, 作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各10uL注入液相色谱仪, 记录色谱图; 按外标法以峰面积计算含量。根据该品种质量标准规定山梨酸的含量应不超过。标示量的100.0% 3．紫外分光光度法 1 材料与方法 1. 1 仪器 

PE - Lambda 35紫外可见分光光度计。 1. 2 试剂 

乙醚(分析纯), 浓度为40 g /LNaOH 溶液,50%浓度的HC l溶液, 1 mg /mL 苯甲酸钠标准溶 

液(国家标准物质中心)。 2 实验内容和步骤 2. 1 测定波长的确定 

准确吸取苯甲酸钠标准溶液1. 00 mL 于100mL容量瓶中, 用蒸馏水稀释成浓度为10mg /L的苯甲酸钠溶液, 摇匀, 以蒸馏水作参比, 在波长分别在200~ 400 nm 波长范围内扫描, 得知苯甲酸 

钠在224 nm处有最大吸收峰。吸取20mL食醋样品于50 mL具塞量筒中,加入1mL盐酸溶液摇匀, 分别用20mL乙醚提取2次, 每次振摇1 m in, 将上层乙醚提取液吸入另一50mL具塞量筒中, 合并乙醚提取液, 将提取液在40e 的水浴上挥发至干, 去醚后的残渣用1mLN aOH 溶液溶解, 再用蒸馏水定容至25 mL, 摇匀, 以蒸馏水作参比, 在波长分别在200~ 400 nm波长范围内扫描, 发现在苯甲酸钠的最大吸收峰224 nm 处无吸收, 说明食醋样品中无干扰测定的成分。 2. 2 标准曲线的绘制 

吸取苯甲酸钠标准溶液0、0. 1、0. 2、0. 5、1. 0、1. 5、2. 0 和3. 0 mL 于100 mL容量瓶中, 分别加入1 mLN aOH溶液, 用蒸馏水定容至刻度, 摇匀。在224 nm 处测其吸光度, 并以吸光度(A )为纵坐标, 浓度C ( mg /L) 为横坐标, 绘制标准曲线,。

中国科学院广州化学研究所分析测试中心手机 / Tel: +86-13113316131电话 /Tel：020-18933946343传真 / Fax: +86-20- 8523 1035email: 13242059406@163.com

address:广州天河区兴科路368号（华南植物园南门）