详细介绍:
一、适用范围
黄曲霉B1试剂盒可定性、定量检测玉米、大米、麦类、豆类、花生、饲料、食用油等样本中的黄曲霉毒素B1。
二、试验原理
采用竞争ELISA,在微孔板上预包被黄曲霉毒素B1抗原,加入样本(或黄曲霉毒素B1标准品溶液)及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素B1与预包被在板孔上的黄曲霉毒素B1抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素B1抗体。与样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素B1结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液,读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素B1抗原的含量成负相关。对照标准曲线,即可得出相应残留物黄曲霉毒素B1的含量。
三、注意事项
1. 室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3. 每加一种试剂前需将其摇匀。
4. 反应终止液为2M盐酸,避免接触皮肤。
5. 不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6. 储存条件:
保存试剂盒于2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。保存期:黄曲霉B1试剂盒有效期为12个月。
7. 试剂变质的迹象:
发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
8. 在加入底物液A液和底物液B液后,一般显色时间为20~30min即可。若颜色较浅,可延长反应时间到35min(或更长),但不得超过40min。反之,则减短反应时间。
9. 该试剂盒最佳反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
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