石蜡包埋组织DNA提取试剂盒-小量
Paraffin Embedded Tissue DNA Extraction Kit
产品货号：EY-TG-43-50/100/200
包装：50T/100T/200T
石蜡包埋组织DNA提取试剂盒产品介绍
样本直接提取无需二甲苯脱蜡，方便用户。在产品独有的缓冲液体系的 作用下，DNA 从石蜡包被样本中快速释放，吸附于高性能的固相基质，洗脱 后即可获得高纯度 DNA。提取到的核酸纯度高于市场上的各种同类试剂盒， 可适用于多种下游应用。

存储和稳定性
试剂盒（Proteinase K、RNaseA 除外）储存在环境温度-40℃~40℃，相 对湿度不大于 75%，无腐蚀性气体的避光处。Proteinase K（固体）或 RNaseA
（固体）长期保存应置于 2~8℃。

保质期：12 个月。

石蜡包埋组织DNA提取试剂盒使用前准备
阅读说明书，备好必需的试剂和仪器。需自备的试剂、耗材有三氯甲 烷（氯仿）、无水乙醇、纯水、PBS(10 mM，pH7.4，福尔马林固定组 织选用)、1.5 ml 离心管等。
全部离心均室温进行。
若低温导致溶液 UL 析出沉淀，可在 50℃左右水浴中重新溶解，摇匀 后使用。
首次使用前，向每瓶溶液 W2 中按瓶上标签要求加入指定量的无水乙 醇（自备），摇匀后标记备用。每管 Proteinase K 或 RNase A 分别用 275μl 纯水（自备）完全溶解。
盒中的 1.5 ml 离心管专用于收集步骤“9”的洗脱液。

石蜡包埋组织DNA提取试剂盒提取步骤
1．样本处理
石蜡切片：取石蜡切片（5~10 μm 厚，1×1 cm2 大小）5~10 张于 1.5 ml 离心管（自备）中。至步骤
石蜡块：取刀片刮取或切成薄片的组织样本 5~10 mg 于 1.5 ml 离心管（自 备）中，至步骤 2。 
注：尽量剔除石蜡，石蜡不会影响消化但是会使消化体积过大。另外尽 量不要使用蜡块样品表面长期暴露于空气中的组织。 福尔马林等固定液中的样本：取样本 5~10 mg，切为数块，置于 1.5 ml 离心管（自备）中。用 PBS 重复清洗 3 次后，至步骤 2。
PBS 清洗方法（单次）：向管中加入 PBS (10 mM，pH7.4)500 μl，涡旋 振荡混匀 15 sec，最高转速（12000 g 或 13000 rpm 以上）离心 1 min， 弃上液。
2.向样本中加入溶液 UL 350 μl（样本应完全浸没于溶液 UL 中，必要时可 短暂离心），80℃ 孵育 60 min，期间每 15 min 取出混匀一次。
3.取出离心管后将其冷却至 56℃以下（室温放置 2~ 3 min 即可），加入 Proteinase K 5μl 及 RNaseA 5 μl，涡旋振荡混匀 15 sec。置 56℃孵育 60 min 或直至组织完全消化，期间每 5 ~10 min 混匀一次。
4.  加入三氯甲烷 350 μl，涡旋 15 sec，最高转速（12000 g 或 13000 rpm 以
上）离心 5 min。取出离心管，取上层清液至 1.5 ml 离心管（自备）中，
加入清液 1.1 倍体积的无水乙醇，涡旋混匀。 注意：勿吸入上层清液下的杂质，杂质会影响后续试验。
5.  将混匀液全部移入套有收集管的 mini 离心柱中，最高转速（12000 g 或
13000 rpm 以上）离心 1 min。取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回收集管中。
6.  向离心柱中加入 500 μl 溶液 W2，最高转速（12000 g 或 13000 rpm 以上） 离心 30 sec。取出离心柱后弃去收集管中废液，将离心柱放回。
7.  重复步骤“6”一次。
8.  最高转速（12000 g 或 13000 rpm 以上）离心 2 min。
9. 将离心柱取出并放入新的 1.5 ml 离心管中。向离心柱中加入 60 ~100 μl 溶 液 TE，室温静置 2~3 min，最高转速（12000 g 或 13000 rpm 以上）离心 1 min。DNA 溶液即被收集在 1.5ml 离心管中。
注：将溶液 TE 预热至 50~60℃时使用，可提高提取效率。

【注意事项】
按说明书内容进行操作，违规操作可能导致实验失败。
盒中试剂如不慎溅到皮肤或粘膜时，立即用大量清水冲洗。
盒中离心柱、离心管为配套使用的一次性产品，不可重复使用、与其他产 品混用或移作它用。
如将 Proteinase K 或 RNaseA 溶解后未立即用完，应分别按每次可能用量 分装成小份后-20℃保存备用。避免反复冻融造成酶活力下降。
仅用于科学研究。