猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体(FMDV)检测试剂盒(ELISA)
猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体(FMDV)检测试剂盒(ELISA)
产品价格:(人民币)
  • 规格:96T
  • 发货地:湖北黄石
  • 品牌:
  • 最小起订量:1盒
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    会员级别:试用会员
    认证类型:企业认证
    企业证件:通过认证

    商铺名称:黄石市艾恩斯生物科技有限公司

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    商品详情

       

      仅供科研使用,不得用于临床检验。

       

      猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体(FMDV检测试剂盒(ELISA

      说明书

       

       

      货号:INS0010004

       

       

       

          使用前,请务必仔细阅读说明书,如有不清楚的,请拨打24h技术支持专线:0714-633855818171667592/18108699172,咨询清楚再进行实验。

       

       

      黄石市艾恩斯生物科技有限公司

      网址:www.inselisa.com

      电话:0714-6338558

       

       

       

      【产品名称】

      通用名称:猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体检测试剂盒(ELISA

      英文名称:Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus NSP(ELISA

       

      【包装规格】

       48T/盒,96T/

      【预期用途】

      本试剂用于检测血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,可用于猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体疫苗免疫效果评价。

       

      【检验原理】

      本试剂盒采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体抗原(固相抗原,货号:INS0010004C)的微孔酶标板中,加入猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体阴阳性对照(货号:INS0010004J)和待测样本,温育洗涤,再加入另一株HRP标记的酶标抗体(酶标抗体,货号:INS0010004E),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物AB,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的浓度正相关,通过测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体。

       

      【主要组成成分】

      主要成分

      组分

      数量

      主要成分

      阴性对照

      1.0ml/

      不含待测物的缓冲液

      阳性对照

      1.0ml/

      含待测物的缓冲液

      包被微孔板

      96T

      预包被固相抗原

      HRP标记抗体

      11mL

      HRP标记的检测抗体

      样品稀释液

      30mL

      样品稀释缓冲液

      底物液A

      6mL

      过氧化脲工作液

      底物液B

      6mL

      TMB工作液

      20×浓缩洗涤液

      30mL

      0.15%Tween20PBS

      终止液

      6mL

      硫酸

      说明书

      1

      --

      自封袋

      1

      --

      不干胶

      2

      --

      稀释板

      1

      --

      阴阳性对照已经通过测试,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。

       

      需要但未提供的材料及耗材

        1、酶标仪

      2、精密移液器及一次性吸头

      3、蒸馏水

      4、洗瓶或者自动洗板机

      5、37℃水浴锅或恒温箱

      6、500ml量筒

        无粉一次性乳胶手套

       

      【储存条件及有效期】

        1、2-8℃保存,切勿冷冻,有效期6个月。

        2、开封使用后,包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中,密闭自封袋,并将全部试剂放回2-8℃冰箱。

        3、开封后,按照建议的条件保存,样品稀释液、包被微孔板和HRP标记抗体,有效期为28天,其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。

       

      【适用仪器】

        半自动的酶标仪,如Thermo MK3,或者国产酶标仪。

       

      【样本要求】

        样本类型和采集

      以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠氮钠做为防腐剂。

           血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,4000rpm条件下离心20min,小心地分离出血清,保存在- 20℃以下,避免反复冻融。

           用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。

           浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

      样本保存和稳定性

      样本在2-8℃条件下,可以储存72h,或者在- 20储存6个月。样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融,使用时在室温下解冻,确保样品均匀充分解冻。


      【检验方法】

      试剂准备

      1、使用前,所有的组分都要至少复温2h,确保充分复温到室温。

      2、浓缩洗涤液:从冰箱取出的浓缩洗涤液,会有结晶产生,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解。浓缩洗涤液与蒸馏水,按1:20稀释,即1份的浓缩洗涤液,添加19份的蒸馏水。

      3、底物:底物液AB,在使用前,按1:1体积充分混合,混合后10分钟内使用。


      操作程序

      1、所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。

      2、按前面试剂准备中描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。

      3、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。

      4、设置阴阳性对照孔、样本孔,阴阳性对照孔各加对照品100μL,样本孔加稀释后样本100μL

      5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min

      6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。

      7、所有孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL

      8、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育30min

      8、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20s,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复4次(共洗板5次)。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。

      9、将底物AB1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱温育10min

         10、每孔加终止液50μl,混匀,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值),无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)

       

      【参考值】

      实验正常的情况下,阴性对照≤0.12,阳性对照≥0.58

      【检验结果的解释】

      1.样品A值≥0.37为阳性;样品A值在0.20.37之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。

      2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。

      【检验方法的局限性】

      1、仅供科研使用,不得用于临床诊断。

      2、在试剂盒标示的有效期内使用,过期产品不得使用。

      3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。

      4、使用试剂盒配套的样品稀释液。

      5、如果样本值高于最高标准品浓度值,请将样本适当稀释后,再重新测定。

      6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果,检测前,请排除该因素。

      7、通过其他方法得到的检测结果,与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。

       

      【产品性能指标】

      1、物理性能

      试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。

      2、阴性结果

      阴性对照的OD值不高于0.12

      3、阳性结果

      阳性对照的OD值不低于0.55

      4、特异性

      本试剂盒识别天然和重组猪口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,与结构类似物无交叉。

      5、稳定性

      2℃-8℃保存,有效期6个月。

      包被板开封后请于28℃避光保存,使用期限为28天。

       

      【注意事项】

      生物安全

      1、检测必须符合实验室管理规范的规定,严格防止交叉污染,所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。

      2、试剂盒的液体组分中,含有proclin-300防腐剂,可能引起皮肤过敏反应,避免吸入烟雾与皮肤接触。

      3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用,避免吸入烟雾。戴上防护手套,实验完成后彻底洗手。

       

      技术提示

      1、混合蛋白溶液时,避免起泡。

      2、加校准品与样本时,每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头,公共组分应该悬臂加样,避免交叉污染。

      3、合适的温育时间,和充分的洗涤步骤,是保证实验结果准确性的必要条件。

      4、底物溶液为无色液体,保存过程中变为蓝色,代表底物溶液已经失效,不得使用。

      5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致,加入终止液后,蓝色底物产物,会瞬间变为黄色。

      6、实验中,用剩的板条,应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

      7、所有液体组分,使用前充分摇匀,严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。

       

      废物处理

        所有使用或未使用的试剂,所有污染性的一次性材料,应当遵循传染性或潜在传染性产品的处理程序,每个实验室都有责任根据其实验的类型和危险性级别,进行废物和污物的处理,同时要严格依照有关规定对待所有的废物和污物。

       

      【基本信息】

        企业名称:黄石市艾恩斯生物科技有限公司

        生产地址:湖北省黄石市黄石港区磁湖路41

        固定电话:0714-6338558

        网    址:www.inselisa.com

        邮    箱:postmaster@inselisa.com


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